革蘭氏染色的結(jié)果（革蘭氏染色步驟）

關(guān)于革蘭氏染色的結(jié)果，革蘭氏染色步驟這個(gè)問題很多朋友還不知道，今天小六來為大家解答以上的問題，現(xiàn)在讓我們一起來看看吧！

1、操作步驟：1 ．涂片將培養(yǎng)的不同菌分別作涂片（注意涂片切不可過于濃厚），干燥、固定。

2、固定時(shí)通過火焰1一2 次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。

3、2 ．染色( 1 ）初染加草酸鉸結(jié)晶紫一滴，約一分鐘，水洗。

4、( 2 ）媒染滴加碘液沖去殘水，并覆蓋約一分鐘，水洗。

5、( 3 ）脫色將載玻片上面的水甩凈，并襯以白背景，用95 ％酒精滴洗至流出酒精剛剛不出現(xiàn)紫色時(shí)為止，約20 一30 秒鐘，立即用水沖凈酒精。

6、( 4 ）復(fù)染用番紅液染1 一2 分鐘，水洗。

7、( 5 ）鏡檢干燥后，置油鏡觀察．革蘭氏陰性菌呈紅色，革蘭氏陽性菌呈紫色。

8、以分散開的細(xì)菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準(zhǔn)，過于密集的細(xì)菌，常常呈假陽性。

9、( 6 ) 同法在一載玻片上以大腸桿菌與枯草芽孢桿菌混合制片，作革蘭氏染色對比。

10、 革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握酒精脫色程度，如脫色過度，則陽性菌可被誤染為陰性菌；而脫色不夠時(shí)，陰性菌可被誤染為陽性菌。

11、此外，菌齡也影響染色結(jié)果，如陽性菌培養(yǎng)時(shí)間過長，或已死亡及部分菌自行溶解了，都常呈陰性反應(yīng)。

12、原理：革蘭氏染色反應(yīng)是細(xì)菌分類和鑒定的重要性狀。

13、它是1884 年由丹麥醫(yī)師Gr 二創(chuàng)立的。

14、革蘭氏染色法（Gram stain ）不僅能觀察到細(xì)菌的形態(tài)而且還可將所有細(xì)菌區(qū)分為兩大類：染色反應(yīng)呈藍(lán)紫色的稱為革蘭氏陽性細(xì)菌，用G＋表示：染色反應(yīng)呈紅色（復(fù)染顏色）的稱為革蘭氏陰性細(xì)菌，用G 一表示。

15、細(xì)菌對于革蘭氏染色的不同反應(yīng)，是由于它們細(xì)胞壁的成分和結(jié)構(gòu)不同而造成的。

16、革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁主要是由膚聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成的，在染色過程中，當(dāng)用乙醇處理時(shí)，由于脫水而引起網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的孔徑變小，通透性降低，使結(jié)晶紫一碘復(fù)合物被保留在細(xì)胞內(nèi)而不易脫色，因此，呈現(xiàn)藍(lán)紫色；革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁中膚聚糖含量低，而脂類物質(zhì)含量高，當(dāng)用乙醇處理時(shí)，脂類物質(zhì)溶解，細(xì)胞壁的通透性增加，使結(jié)晶紫一碘復(fù)合物易被乙醇抽出而脫色，然后又被染上了復(fù)染液（番紅）的顏色，因此呈現(xiàn)紅色。

17、革蘭氏染色需用四種不同的溶液：堿性染料（basic dye ）初染液；媒染劑（mordant ) ；脫色劑( decolorising agent ）和復(fù)染液（counter stain ）。

18、堿性染料初染液的作用象在細(xì)菌的單染色法基本原理中所述的那樣，而用于革蘭氏染色的初染液一般是結(jié)晶紫（crystal violet ）。

19、媒染劑的作用是增加染料和細(xì)胞之間的親和性或附著力，即以某種方式幫助染料固定在細(xì)胞上，使不易脫落，碘（iodine ) 是常用的媒染劑。

20、脫色劑是將被染色的細(xì)胞進(jìn)行脫色，不同類型的細(xì)胞脫色反應(yīng)不同，有的能被脫色，有的則不能，脫色劑常用95 ％的酒精（ethanol ）。

21、復(fù)染液也是一種堿性染料，其顏色不同于初染液，復(fù)染的目的是使被脫色的細(xì)胞染上不同于初染液的顏色，而未被脫色的細(xì)胞仍然保持初染的顏色，從而將細(xì)胞區(qū)分成G ＋和G 一兩大類群，常用的復(fù)染液是番紅。

本文分享完畢，希望對大家有所幫助。

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