一種用于揭示活細胞結(jié)構(gòu)動力學的新型偏振熒光探針
東京醫(yī)科牙科大學(TMDU)的研究人員與海洋生物實驗室(MBL)和RIKEN的科學家合作,開發(fā)了一種用于活細胞熒光成像的新技術(shù),從而使他們在海星早期胚胎中發(fā)現(xiàn)了新的肌動蛋白結(jié)構(gòu)。
東京-監(jiān)視單元構(gòu)建塊的對齊方式對于了解單元的構(gòu)建方式非常重要。通過與MBL的成像科學家合作,研究人員開發(fā)了一種名為POLArIS的新探針,可以對活細胞中的分子方向進行實時成像。
熒光團在發(fā)光時會發(fā)出偏振光。偏振熒光的取向與熒光團的取向緊密相關(guān)。如果感興趣的分子與諸如綠色熒光蛋白(GFP)的熒光標簽剛性連接,則來自熒光團的偏振熒光將報告該分子的方向。
這項研究的主要作者之一Ayana Sugizaki說:“在以前的監(jiān)測目標蛋白質(zhì)方向的方法中,研究人員需要開發(fā)有效的受約束的GFP標簽方法,每種目標蛋白質(zhì)可能會有所不同。”“ POLArIS使用與GFP牢固連接的類似抗體的結(jié)合劑,可以進行特異性和通用的限制性標記,”另一位主要作者佐藤啟介(Keisuke Sato)補充說。該團隊使用市售的Adhiron分子(現(xiàn)已更名為“ Affimer”)作為結(jié)合分子,將GFP與靶蛋白連接起來,并通過旋轉(zhuǎn)約束方式連接Adhiron和GFP來開發(fā)POLArIS(圖1)。因為可以通過噬菌體展示篩選從分子庫中輕松選擇與目標分子特異性結(jié)合的Adhiron分子,所以POLArIS可以針對任何目標生物分子進行設計。POLArIS可以在特定的細胞類型和細胞器中表達,將對研究廣泛的細胞培養(yǎng)物,組織和整個生物體中分子裝配體的結(jié)構(gòu)動力學非常有用。國立先進工業(yè)科學技術(shù)研究院(AIST)資深研究員谷谷智美說:“從熒光偏振成像的角度來看,POLArIS具有遺傳優(yōu)勢,因此具有明顯的優(yōu)勢。”自從他是MBL的副科學家以來,他一直從事這個項目。POLArIS可以設計用于任何感興趣的生物分子。POLArIS可以在特定的細胞類型和細胞器中表達,將對研究廣泛的細胞培養(yǎng)物,組織和整個生物體中分子裝配體的結(jié)構(gòu)動力學非常有用。國立先進工業(yè)科學技術(shù)研究院(AIST)資深研究員谷谷智美說:“從熒光偏振成像的角度來看,POLArIS具有遺傳優(yōu)勢,因此具有明顯的優(yōu)勢。”自從他是MBL的副科學家以來,他一直從事這個項目。POLArIS可以設計用于任何感興趣的生物分子。POLArIS可以在特定的細胞類型和細胞器中表達,將對研究廣泛的細胞培養(yǎng)物,組織和整個生物體中分子裝配體的結(jié)構(gòu)動力學非常有用。國立先進工業(yè)科學技術(shù)研究院(AIST)資深研究員谷谷智美說:“從熒光偏振成像的角度來看,POLArIS具有遺傳優(yōu)勢,因此具有明顯的優(yōu)勢。”自從他是MBL的副科學家以來,他一直從事這個項目。
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