關(guān)于pcr引物加多了有沒有影響,pcr引物這個(gè)問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡稱PCR(Polymerase Chain Reaction) (又稱:多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)) PCR是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫、低溫退火(復(fù)性)及適溫延伸等反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便、省時(shí)等特點(diǎn)。
2、它不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的地方。
3、PCR又稱無細(xì)胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。
4、擴(kuò)展資料:PCR由--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:模板DNA的模板DNA經(jīng)加 熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;模板DNA與引 物的退火(復(fù)性)模板DNA經(jīng)加熱成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合;引物的延伸DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈,重復(fù)循環(huán)--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。
5、每完成一個(gè)循環(huán)需 2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。
6、到達(dá)平臺期(Plateau)所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。
7、參考資料來源:百度百科-PCR擴(kuò)增。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助。
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