監(jiān)視單元構(gòu)建塊的對齊方式對于了解單元的構(gòu)建方式非常重要。通過與MBL的成像科學家合作，研究人員開發(fā)了一種名為POLArIS的新探針，可以對活細胞中的分子方向進行實時成像。
熒光團在發(fā)光時會發(fā)出偏振光。偏振熒光的取向與熒光團的取向緊密相關(guān)。如果感興趣的分子與諸如綠色熒光蛋白(GFP)的熒光標簽剛性連接，則來自熒光團的偏振熒光將報告該分子的方向。
這項研究的主要作者之一Ayana Sugizaki說：“在以前的監(jiān)測目的蛋白方向的方法中，研究人員需要開發(fā)有效的受約束的GFP標簽方法，每種目的蛋白可能會有所不同。”“ POLArIS使用與GFP牢固連接的類似抗體的結(jié)合劑，可以進行特異性和通用的限制性標記，”另一位主要作者佐藤啟介(Keisuke Sato)補充道。該團隊使用市售的Adhiron分子(現(xiàn)在更名為“ Affimer”)作為結(jié)合分子將GFP與靶蛋白連接，并通過旋轉(zhuǎn)約束方式將Adhiron和GFP連接來開發(fā)POLArIS(圖1)。由于可以通過噬菌體展示篩選從分子庫中輕松選擇與目標分子特異性結(jié)合的Adhiron分子，POLArIS可以設(shè)計用于任何感興趣的生物分子。POLArIS可以在特定的細胞類型和細胞器中表達，將對研究廣泛的細胞培養(yǎng)物，組織和整個生物體中分子裝配體的結(jié)構(gòu)動力學非常有用。“從熒光偏振成像的角度來看，POLArIS具有遺傳上的優(yōu)勢，因此具有明顯的優(yōu)勢，”國立先進工業(yè)科學技術(shù)研究院(AIST)的高級研究員Tomomi Tani說。自從他是MBL的副科學家以來，他一直從事這個項目。組織和整個生物。“從熒光偏振成像的角度來看，POLArIS具有遺傳上的優(yōu)勢，因此具有明顯的優(yōu)勢，”國立先進工業(yè)科學技術(shù)研究院(AIST)的高級研究員Tomomi Tani說。自從他是MBL的副科學家以來，他一直從事這個項目。組織和整個生物。“從熒光偏振成像的角度來看，POLArIS具有遺傳上的優(yōu)勢，因此具有明顯的優(yōu)勢，”國立先進工業(yè)科學技術(shù)研究院(AIST)的高級研究員Tomomi Tani說。自從他是MBL的副科學家以來，他一直從事這個項目。
通過使用肌動蛋白探針，研究小組發(fā)現(xiàn)了海星胚胎分裂細胞中高度有序的F-肌動蛋白結(jié)構(gòu)(稱為FLARE結(jié)構(gòu))的瞬時出現(xiàn)和溶解。通訊作者Sumio Terada說：“我們發(fā)現(xiàn)該結(jié)構(gòu)與星形微管相關(guān)聯(lián)地延伸到了細胞皮層。”他曾與他在TMDU的同事經(jīng)常從東京來MBL參觀。“星形微管負責將紡錘體連接到細胞皮層并正確定向，從而控制細胞分裂的平面。”確定細胞分裂平面的機制是控制發(fā)育的許多方面的關(guān)鍵，但仍然是一個關(guān)鍵的謎。徑向排列的肌動蛋白結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)將闡明細胞生物學最基本的未解決問題。
標簽： 偏振熒光探針
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