關(guān)于cas9基因編輯原理,基因編輯技術(shù)原理這個(gè)問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、基本原理CRISPR簇是一個(gè)廣泛存在于細(xì)菌和古生菌基因組中的特殊DNA重復(fù)序列家族,其序列由一個(gè)前導(dǎo)區(qū)(Leader)、多個(gè)短而高度保守的重復(fù)序列區(qū)(Repeat)和多個(gè)間隔區(qū)(Spacer)組成。
2、前導(dǎo)區(qū)一般位于CRISPR簇上游,是富含AT長(zhǎng)度為300~500bp的區(qū)域,被認(rèn)為可能是CRISPR簇的啟動(dòng)子序列。
3、重復(fù)序列區(qū)長(zhǎng)度為21~48bp,含有回文序列,可形成發(fā)卡結(jié)構(gòu)。
4、重復(fù)序列之間被長(zhǎng)度為26~72bp的間隔區(qū)隔開。
5、Spacer區(qū)域由俘獲的外源DNA組成,類似免疫記憶,當(dāng)含有同樣序列的外源DNA入侵時(shí),可被細(xì)菌機(jī)體識(shí)別,并進(jìn)行剪切使之表達(dá)沉默,達(dá)到保護(hù)自身安全的目的。
6、工作原理當(dāng)細(xì)菌抵御噬菌體等外源DNA入侵時(shí),在前導(dǎo)區(qū)的調(diào)控下,CRISPR被轉(zhuǎn)錄為長(zhǎng)得RNA前體(Pre RISPR RNA,pre-crRNA),然后加工成一系列短的含有保守重復(fù)序列和間隔區(qū)的成熟crRNA,最終識(shí)別并結(jié)合到與其互補(bǔ)的外源DNA序列上發(fā)揮剪切作用。
7、目前發(fā)現(xiàn)的CRISPR/Cas系統(tǒng)有三種不同類型即I型、II型和III型,它們存在于大約40%已測(cè)序的真細(xì)菌和90%已測(cè)序的古細(xì)菌中。
8、其中II型的組成較為簡(jiǎn)單,以Cas9蛋白以及向?qū)NA(gRNA)為核心組成,也是目前研究中最深入的類型。
本文分享完畢,希望對(duì)大家有所幫助。
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